快速大批量筛选HBsAg阳性患者的改进方法

张必道
云南省沾益县卫生防疫站中国沾益655331

文章主题:HBSAg 阳性患者 筛选 快速 大批量 灵敏度

文章内容：?54?中华国际医药杂志2003年6月第2卷第2期&;222003[文章编号]1680—6247(2003)02—0154—01快速大批量筛选阳性患者的改进方法张必道(云南省沾益县卫生防疫站.中国沾益655331)[关键词]快速;大批量;阳性患者;改进;灵敏度[中圈分类号]446.1[文献标识码]随着《食品卫生法》,《公共场所卫生管理条例》,《学校卫生管理条例》等法律法规的颁布实施以及全社会对健康状况的越来越重视,要求从事卫生检验的工作人员能够从容面对大规模体检任务,为此,广大卫生检验人员做出了不少努力,创造性地发明了各种快速检测方法,并不断地将这些方法加以完善.现将快速大批量筛选(乙型肝炎表面抗原)阳性患者的改进方法(标准法和非标准法)介绍如下.1材料和方法1.1材料塑料无毒毛细采血管(外径约2.5～3.0,长约6,用医用胶布顺序编号待用),一次性指头采血针,消毒酒精棉球,洁净的型微量血凝板,微量振荡器,冻于乙型肝炎表面抗原诊断血球及其稀释液,离心机,5微量移液器及其洁净移液毛细管,3540滴管(最好为401)等.1.2方法采血前做好记录,要求被检者登记编号与采血管编号相同.用一次性采血针在被检者指头部采血于毛细采血管内.将盛有被检者血液的塑料毛细管封口,用橡皮筋捆扎好口朝上,置入离心机内以适当转速分离出血清后,口朝上放置待用.用5微量移液器于被检血清中各取出5血清,置入微量血凝板型孔内,并将剩余血清摆放于一操作台上,其摆放形式及位置与相应血清在血凝板型孔中的位置对应,例如:血清所在位置是型板的第3行第7列,则对应的毛细采血管也应放在第3行第7列,以方便从中挑出阳性血清.(1)标准法:操作中,要求剪去毛细移液管的已取过血清的受污染部分后才能再用于下一份血清取样,这样有利益保障其他待检血清不因污染而产生假阳性.(2)非标准法:我们根据以往工作中的经验,从大批量食品从业人员,学生等体检人群中筛选阳性患者时,由于被检对象大多为正常人群,故在实际操作中若样品量比较大时,可以不必每次取血清后都剪去一段已用过的毛细移液管,但必须将毛细移液管头部的残余血清在卫生纸[作者筒介]张必道(1965),男(汉族),主管医师上吸干,移液时移液管头部不宜浸入血清过深,其位置以能够刚好取够5血清为宜,这样可将上次残余血清对该样品的污染程度降至最低,同一段毛细管不宜重复使用太多次,一般使用6～2次后应将该段剪去.此法只适用于阳性初选.若初选出的可疑阳性血清不止一个,则需将可疑阳性血清经过再次筛选或直接做倍比稀释确定阳性结果.再次筛选时必须使用标准操作法,所筛选出的"阳性患者"需根据实际情况谨慎报告,建议滴度在:8～:32的"阳性患者"需另采血液用标准操作法或其他方法验证.取出1支冻于乙型肝炎病毒表面抗原诊断血球及其稀释液各1支,取稀释液约1.5～2.0置入另一结净安瓿内或另一当天打开的相同稀释液内待用,然后将余下约8～8.5稀释液完全用于稀释1支诊断血球,并充分混匀后在上述加有待检样品的各个型孔内各加入滴悬液,于微量振荡器上振摇3～5后或用手轻轻拍击几下,置入37℃温箱中恒温3～60观察结果.1.3结果判断阳性结果判断方法参照《冻干乙型肝炎病毒表面抗原诊断血球使用说明书》进行判断.此法检出灵敏度范围为:8～:9.2讨论改进法与其所使用试剂使用说明书中介绍的反向血凝试验方法比较,它更快速,方便地实现阳性初选不需每份血清都做倍比稀释,血清需要量小,便于采集.改进法与我站过去所使用的快速方法比较也有更为快速,灵敏度更高,更经济节约等优点.对于灵敏度低于:8～:9阳性患者,老方法和改进法均不能检出,但考虑到改进法主要是针对学生或食品等从业人员进行阳性筛选,而低于该灵敏度时受检者可能是阳性患者的概率极小.因此,改进法完全能适应大批量阳性筛选.[收藕日期][本文■■]2003—05—2李文