反相高效液相色谱法测定刺五加药材中异嗪皮啶含量

王宪明 周珏 曲凡
[1]中国医科大学附属第一医院,辽宁沈阳110001 [2]浙江大学药学院,浙江杭州310058 [3]浙江大学附属妇产科医院,浙江杭州310006

文章摘要:目的：测定刺五加药材中异嗪皮啶的含量。方法：应用RT—HPLC法，检测波长为343nm，流动相为乙腈-磷酸水（35：65）系统。结果：异嗪皮啶含量在0．40—2．00pg范围内，峰面积与其浓度呈良好线性关系（r=0．9999），RSD为2．3％（n=5）。结论：该法可以反映刺五加药材中异嗪皮啶的质量，重现性好，具有实用性。
文章主题:反相高效液相色谱法 异嗪皮啶 刺五加药材

文章内容：2007年9月第30卷第3期.2007.1.30,.3成部中医药大学学报?59?反相高效液相色谱法测定刺五加药材中异嗪皮啶含量王宪明周珏2曲凡(1.中国医科大学附属第一医院,辽宁沈阳110001;浙江大学药学院,浙江杭州30058;浙江大学附属妇产科医院,浙江杭州310006)摘要:目的:测定刺五加药材中异嗪皮啶的含量.方法:应用—法,检测波长为3431//1,流动相为乙腈一磷酸水(35:65)系统.结果:异嗪皮啶含量在.4一2.范围内,峰面积与其浓度呈良好线性关系(=0.9999),为2.3%(=5).结论:该法可以反映刺五加药材中异嗪皮啶的质量,重现性好,具有实用性.关键词:反相高效液相色谱法;异嗪皮啶;刺五加药材中图分类号:284.1;931.6献标识码:文章编号:1004—0668(2007)3—0059—04刺五加为五加科刺五加(—..)的干燥根及根茎,属滋补性中药.异嗪皮啶是刺五加的主要活性成分也是刺五加的特异性成分.故本研究测定此成分含量,以实现对刺五加药材中该成分的质量控制.1仪器与试药一2010型自动进样高效液相色谱仪(本一岛津公司);乙腈:级,美国迪马(—)公司;水:娃哈哈纯净水(杭州娃哈哈集团有限公司);其余试剂为分析纯;异嗪皮啶对照品购自中国药品生物制品检定所;刺五加药材采于黑龙江省五常地区,样品由中国医科大学鉴定.2方法与结果2.1色谱条件18色谱柱(4.6-×250ⅱ1,5),流动相为乙腈:0.1%磷酸水(35:65).柱温:4℃;流速为1.0/;检测波长343啪.2.2对照品溶液的配制取适量异嗪皮啶对照品用甲醇配制成浓度为0.0150/的对照品溶液.2.3标准曲线制各分别精密吸取异嗪皮啶对照品溶液2,4,6,8,注入液相色谱仪,每个量重复进样3次按上述色谱条件测定以峰面积积分值为纵坐标,对照品的进样量为横坐标绘制标准曲线.回归方程为=38399+20080,=0.9999,异嗪皮啶含量在0.59一3.30范围内,峰面积与其浓度呈良好线性关系.2.4精密度实验吸取同一份供试品溶液连续进样5次,进样量,测得的异嗪皮啶峰面积平均值为40095,为2.%(=5).表明精密度良好.2.5重现性实验分别取同一批样品共5份,每份约1精密称定按"样品测定"项下方法制各供试品溶液测定并计算异嗪皮啶的含量,平均值为0.8301/,为2.3%(=5),表明样品重现性良好.2.6稳定性实验取同一批刺五加,按样品制备方法制备供试品溶液,分别在0,3,6,9,12测定色谱图,对其面积积分,为2.4%(//,=5),表明样品稳定性良好.2.7加样回收率实验取已知含量的同一供试品6份每份约0.5精密称定,精密加入异嗪皮啶对照品溶液,按"样品测定"项下方法制各供试品溶液并测定计算平均回收率为101.90%,为2.3%(=5).2.8样品测定取供试品精密称定,加水25转溶到分基金项目:黑龙江省研究生创新科研基金(编号:26—174)作者简介:王宪明,33岁;药师;研究方向:中药有效成份研究.?60?成卜医药大学学报液漏斗中,加氯仿分3次振摇萃取,每次25.合并氯仿层萃取液,减压浓缩.残渣加入甲醇溶解,转移至10容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀.用0.45微孔滤膜过滤,作为供试品溶液.分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各注入高效液相色谱仪,按外标法计算供试品中异嗪皮啶含量测定结果见表1.供试品高效液相色谱图见图.表1刺五加中异嚓皮啶含量测定样品编号含量,,/%1.46×10—2士1.26×10—41.121.23×10—2±1.03×1041531.43×10—2±6.66×10—41.310".].:∞』～～一,～一一…,,一一～一一一:～:'+',为异嗪皮啶图1供试品高效液相色谱图3讨论含刺五加的中成药很多,异嗪皮啶是刺朋神作用灼主要成分之一,且很多含刺五加的中成药均以异嗪皮啶为对照品进行含量测定.本文以刺五加药材为供试品,以异嗪皮啶含量为指标,利用—法对其进行测定.该法可以反映刺矗加药材中异嚷皮啶的质量,重现性好:疑有关性.参考文献1]陈新歉,金有豫.新编药物学[磺,第3版.北京:人民卫生出版蕾,1992:488.[2]刘艳新,麻风华,王力.高效液相色谱法测定剃五船脑灵液中异嗪皮啶含量[]中咽药业,215,4(10):42.3]潘海峰,李云霞.法测定强力宁片中异嗪皮啶的含量[].中草药,2004,35(3):279…280.[4]赵陆华,屠颖,赵振宇等.'测定刺五加软胶囊中异嗪皮啶含量[].中草药,2003,34(】0):911—92牧稿翻:2007.-22跚!茄:,,,?\\,,,;;,.,:-二,01\;,矗,,0::',1"(上接第59页)2.9样品测定分别精密称取黑龙江,重庆万县,陕西产紫花地丁粉末约0.,按照"2.3.1"项下方法制备供试品溶液.精密吸取对照品和供试品溶液各0,注入高效液相色谱仪,按选定色谱条件测定,采用外标一点法计算紫花地丁中秦皮乙素含量,结果见表7.表7不同产地紫花地丁中秦皮乙素的含量(11=3)产地黑龙江重庆万县陕西一一垒量一)3670.22349(%)1.921.5对不同产地紫花地丁中秦皮乙素的含量测定结果表明,黑龙江产紫花地丁中秦皮乙素含量最高.3讨论3.1试验过程中对不同极性的流动相,以及不同比例的甲醇一.1%磷酸进行考察.结果以甲孵一0.1%磷酸(15"85)为最佳流动柏组成,峰形对称,分离度良好.3.2不同产地紫花地丁中秦皮乙素的含量测定结果表明,吉林产紫花地丁中秦皮乙索含摄最高.其药效相关性还需进一步研究.参考文献[11中国药典委员会中华人民共圄翁典[].2㈣5农-"版.一部.北京:化学工业出版社2[2中国科学院中国植物志编辑委员会,中同植物志第五十一卷磁]￡京:科学出版社,1991:6;3[3]楼之岑,秦波.常用中药材品种整理和质量研究]北京:北京医科大学,中国协和医科大学联合版枉,1995:640(峻稿目鲻:27-03