中医药研究中脑出血动物模型的应用现状

贾真 郑春叶 卢明 黄燕
[1]广州中医药大学博士研究生,广东广州510405 [2]广东省中医院,广东广州510630

文章摘要:对近年来中医药研究领域运用的脑出血动物模型的造模方法：胶原酶诱导法、脑内注血法、自发性脑出血大鼠、明矾溶液脑内注射法、病证结合法的应用进行综述并对其做一评价，从而提出建立合理的病证结合动物模型是中医药防治脑出血实验研究的基础。
文章主题:脑出血 中药疗法 动物模型 综述

文章内容：辽宁中医杂志2008年第35卷第1期中医药研究中脑出血动物模型的应用现状贾真,郑春叶,卢明,黄燕(1.广州中医药大学博士研究生,广东广州510405;2.广东省中医院,广东广州510630)?155?摘要:对近年来中医药研究领域运用的脑出血动物模型的造模方法:胶原酶诱导法,脑内注血法,自发性脑出血大鼠,明矾溶液脑内注射法,病证结合法的应用进行综述并对其做一评价,从而提出建立合理的病证结合动物模型是中医药防治脑出血实验研究的基础.关键词:脑出血;中药疗法;动物模型;综述中图分类号:743.34;277.7文献标识码:文章编号:1000—1719(2008)01—0155—03,-,,(1..,,510405,,;2.,510630,,):.—,,.—.:;;;脑出血是急性脑血管疾病中的急危重症,其发病率,死亡率和致残率均较高,但目前现代医学尚无肯定有效的治疗方法;中药防治脑出血具有一定的优势,而且很多研究机构开展了动物实验研究;同时众多学者认识到建立符合中医自身的特点脑出血动物模型的重要性,基于这一原因,本文对近年来中医药研究中脑出血动物模型的应用现状进行综述.1中医药研究中胶原酶诱导大鼠脑出血模型的应用胶原酶诱导大鼠脑出血模型的建立多参照—等方法,将大鼠麻醉后,采用立体定位仪定位,根据不同的部位(尾状核,纹状体,苍白球)确定注射点,用微量注射泵注入含ⅶ型胶原酶生理盐水造模,注射胶原酶后4脑出血即达到高峰,并出现明显脑水肿,24脑水肿即达到高峰.胶原酶诱导大鼠脑出血模型是目前在脑出血研究中使用得最多的一种脑出血动物模型.该模型的特点:脑出血非常明显,出血是弥漫性的广泛出血,以渗血为主,产生的血肿大小基本一致2,该模型的病理变化与脑出血病人的相一致而且可以生成较长时间的血肿,3,多有典型的神经功能障碍,且运动功能的缺失长期存在,可以作为评价脑出血后神经功能缺失和用于促进功能恢复的干预手段的效果.因此笔者认为该模型适用于观察神经功能缺失,血肿大小的改变及其与血肿相关的一些研究.但是由于胶原酶注入模型所致的出血以渗血为主,该模型与临床急性脑出血的发病情况不相同;个体间脑内血肿的体积和部位的差异较大,最小血肿和最大血肿的体积比可达1:46,而且不同个体的血肿部位存收稿日期:2007—08—28基金项目:国家自然基金资助项目(30472208)作者简介:贾真(1979一),女,山西五寨人,博士研究生,主攻方向:中医药防治脑血管疾病研究.在显着性差异,造成预后评估偏差过大,模型个体问血肿体积和部位的差异可导致运动功能缺损程度的差异.近年来,胶原酶诱导大鼠脑出血模型在中医药研究中的应用主要集中在以下几个方面.1.1观察脑出血后脑水含量及脑组织病理结构的变化采用该模型,魏微等观察$一七叶皂苷钠对大鼠脑出血后脑水含量及脑组织超微结构变化的影响,结果显示药物组脑含水量明显低于对照组,超微结构观察药物组神经元及内皮细胞肿胀程度较对照组明显减轻.陈旭等则指出$一七叶皂苷钠抗脑水肿的药理作用机制中可能有脑内精氨酸加压素()参与.1.2探讨中药保护神经元的作用机制1.2.1抑制细胞凋亡何泽云等用该模型观察中药对大鼠脑出血后迟发性神经细胞损伤的保护作用,结果发现参麦注射液减少大鼠脑出血后海马.区锥体细胞凋亡数目,抑制血肿周围脑组织线粒体片段缺失,使—表达明显下调并时限延长.梁清华等采用同样方法制作的模型观察风火痰瘀(镇肝熄风汤)同治对脑出血大鼠海马细胞色素氧化酶()活性与锥体细胞密度的影响,结果发现此方药可维持脑出血大鼠活性,减少细胞缺失,维持锥体细胞密度.王立等用该模型探讨大鼠脑出血后血肿周围神经元活化一3的表达及涤痰汤的干预作用,大鼠脑出血后一3表达明显上调;涤痰汤能减少活化一3的表达,阻止神经元的凋亡.而肖岚等则利用该模型从信号转导的角度探讨脑溢安(丹皮,生地,地龙等)对脑出血的保护作用机制,结果提示脑溢安能抑制脑出血损伤激活的38信号转导通路,从而阻止细胞凋亡的发生.1.2.2抑制血肿红细胞降解产物对脑细胞的损伤近年有学者注意到,血肿红细胞降解产物能启动一系列脂质过氧化过程,损伤细胞和生物膜,破?156?坏血脑屏障,诱发脑水肿,认为这可能是脑出血后细胞损伤的重要机制之一¨.唐涛等采用同样方法制作的模型证实脑溢安可促进脑内含铁血红素氧合酶1(降解的限速酶)的表达,这可能是其通过活血化瘀治疗脑出血,实现脑保护的机制之一.1.2.3促进神经再生黎杏群'等采用该模型发现脑溢安能维持脑出血后神经干细胞的增殖,促进脑出血后血肿周围神经蛋白及的表达,增加血肿区多唾液酸神经细胞黏附分子阳性表达,强化神经干细胞重塑,从而发挥其抗缺血缺氧损害的脑保护作用,促进脑出血后神经再生与功能恢复.1.2.4抑制炎性反应周庆博等采用该模型观察表明清热解毒法是通过减少一1和一的产生,释放,抑制炎症反应,达到保护神经细胞的目的.2中医药研究中脑内注血法制作脑出血模型的应用脑内注血方法是指用立体定向仪向脑内直接注入自体动脉血或凝血块制作脑出血模型,曾先后采用狗,猫,猴,大鼠等,该模型可以较好地模拟出血肿的占位效应及血块释放物的毒性作用.脑内注血模型可观察血液凝固过程中血管活性物质释放对脑循环及脑组织的影响,适合研究脑实质出血的自然过程,病理形态学等_,但是在注射自体血过程中,血液沿针道反流难以控制,使靶点处难以形成足够容量及压力的血肿,减弱了占位效应,形成的血肿也不规则,重复性较差.为了避免了上述问题,等报道采用两次注射法可有效防止反流,提高成功率.即在大量注血之前,首先注射少量血液,凝固后将针道堵塞,第二次注血时,针道反流将明显减轻,成为常用的脑出血模型.该方法造成的脑出血模型在一定程度上类似人脑出血的病理过程,而且操作简单,通过立体定向手术可造成各种部位的脑出血;血肿周围的水肿带比较明显,有较多的中性粒细胞和小胶质细胞浸润.综上所述,该模型适合于研究脑出血的占位效应,脑水肿及来自血管的活性物质等在脑损伤中的作用和各种药物的疗效及其作用机制的研究.但是脑出血模型大鼠