多效唑和油菜素内酯对烟草愈伤组织生长和分化的影响
文章内容:绍必帅0.?:1992年第6期0^.]7,$(生化系)摘要多鼓(?'11¨简鞯…)足近年来研究相应用较多的一种新型,高教.广诺的植物生长延缓荆.车实驻表明,它在较高旅度(&;5¨_)下能延缓烟草窟掂组飒的生长.井抑制其分化:但在抵浓度(0.12.''∞)下却能促进螭草禽伤组织昀分化.低浓度多效唑的应用,对于放通过组飒培养以快速获得试营苗的实驻来说,无疑是一千可以尝试的方法.本文同耐就新型植辏鼗誊——袖菜素^酯(.ⅱ口?菏稚ⅱ)对烟草盘伤盟轵的生长和分化的蔟应进行了择索辖粜表明.袖菜素内醋对促分化无明星舯敛应,而且其在组缎培养巾螗应用浓度不能超过0.01¨_,否5将严重榔材盒伤组织鹄生长并对组飒细船产生不刹柞甩.关键词:多效唑;汕菜索内酯;禽伤组织;分化0弓言阄啤植锄组织培养在生产上具前很高们应用价伍,其中无性系快速繁殖,试管茁商业化是植物组织培养在应用上的主流之一.而【1愈仿组织分化,产生试管苗是关键的一步.因此如何快速诱导愈伤组织和加速其分化,产生多的试管苗,刘提高组织培养的应用价值具有十分普遍的意义多效唑【化学名:(23)一一(一扭苯基)一4,4一二甲基一2—2(1—2,'一三唑一基)戊醇一3】,简球…妊必国有公司在20世纪代拳推出的一个高效.低霉.广谱性的植物生∈延缓剂…,具有多方蕊的生理效应.在水稻,,卜麦等作物上已得到了广泛的应用'.油菜素内酉肓(日8¨[10稿弥)足0等人于1979年首次从油菜花粉巾分离出来井鉴定出它的结构舶.它的监瓒定丁广泛的趣.其主要功能是促进细胞伸长和分裂,但又不同于生长索和赤霹岽,也不同于细胞分裂索"'".它括性很高.在植物界广泛存在,有望成为植物第六大激索,.畚文992年月9日收到第期陈瑛:多效唑和油菜索内酮对烟草禽伤组织生长和分代舶影响76关于..和ⅱ的研究报遭很多,但对其在组织培养上的作用研究不多.而对这两种不同奏噩韵生长恬性物质进行比较研究,则尚束见报道.本文以烟草为材辩,就"?和睇对童伤组织的分化和生理性状的影响进行了研究.1材料与方法取普通婀草(£ⅱ加)子叶,用饱和漂白粉液初步灭菌,再用0.1%升汞灭菌分钟,然后用无菌水冲洗干净后在超净工作台上切成约0.5见方舶小块,接种于8+"1.0/'0.5/的培养基上,(此培养基作为基本培养基),在25±1温度,[0001500-的光强下,连续光照培养.长出的愈伤组织作为实暄材料.在无菌条件下,把此翕仿组织分害成约20∞小块,分别接种到附加各种不同浓度的...和ⅱ的基本培养基上.(培养基为15.8,蔗塘为%,琼脂为1.0%).在26±1'的温度,00的光强下,连续光堵养.各组试验每次接种6瓶,每瓶内接3块愈伤组织,并重复戎.试验所用的和.?-均由抗大生物系植物组织培养室提供.靖莽天,用内眼可观察到有绿色芽点开始出现.培养一个半月后进行芽点统计.分化指标出芽翕块占总翕块敷的百分率和平均每块寂伤组织上长的芽点数来表示.禽伤组缎同时称重,并其呼吸强度,过氧化物酶活性和电导宰.呼吸强度定:用肼一型瓦氏呼吸仪定.参【游树融等(990)的方法.过氧化钧酶括力定:参照.,.''1.(1977)的方法….电寻宰舅定:参照李振茸等(88)的方法",将鑫伤组织按一定重量置于盛有五离子水的小姥杯中,在程泡一定时阉持电导率稳定后,定水的电导宰,所用仪器为8一儿^量电导辜仪.结果1.1.和对愈伤组织生长和分化舶影响'襄1?.一对禽仿组织生长和分化的影响,-..和且分属于生长廷缓卉聿和生长促进荆,但从表和表中看出两者在低浓度下对翕仿绍兴师专学报992年组织分化的诱导作用正好相反.".表现了明显的诱导分化的作用,以1.处理效果为量佳.它不仅芽点多,出芽早,而且芽生长整齐,色泽好.而用雎处理,不臂哪种浓度均无一分化.这与竹糨哲去等的报道相同,但与陈季楚,迟群芬的报道相舁….这可能与植物种类的差舁有关,不同的植物常会引起不同的反应结果.表2对禽伤组筝生长和分化的影响".和孤在较高浓度下,虽然对分化都起抑制作用,但就其禽仿组筝鹕大小来说,浓度变化的影响刊远远大于-的谁度变化.如图1.图2所示.在话诫度下能促进植物生长窑的报道已程寥,在奉实验中,它也同样促进了禽伤组筝的生长,但浓自度提高0倍,其抑毒敷果就极为明_呈.用.处理的禽伤组筝生卜置长量仅为.处理时的●%;而用1"?处理的生长量仍有".娃理的5%.这说明_是车常高敷的植物蠹索,使用时格须特崩注意."?诫度("1)高浓度腿对斑伤组织的抑制不图1."对翕伤组飒生长的影响仅表现在大小重量上,也表现在色泽上.处理的禽伤组筝呈褐色,而且其褐色程虚随豫的浓度提高而明星加居.为此,笔者进一步铡定了反映其生理性状皓一些指标.,.,-"和职对童仿蛆甥过氯化钧奠活力和电导宰的影响'从图4可看出,●.1,田肌址理的禽伤组筝其△.,值比宋褐变的对[1组高出两借以上.而"?处理的禽佑组织因生长廷缓,叶绿索含量有所增加,海眼可见它比对照组色绿.在图8中可见.--处理的愈佑组织其过氧化物蒋活力比舛照组略低,这表明锔变程度与△'.值存在着一定的定量关系.从禽伤组筝△.,值变化可提供其褐变程度的数量让概念.蒋跃明等(11)也报道:'香焦果发的褐变与∞值呈显着的正相关.毒3第6期陈瑛:多效唑和油榘索内酯对烟草愈伤组织生长和分化的影响77植物组缎的衰老必定与细胞膜的抗性下降相关.电导率的大小能够反映细胞膜的透性大小,由此也可看出其衰老程度.比较图3与图6,图4与图6,不难看出两图具有很大的相似性.用0.1"的ⅱ处理韵愈伤组织其电导率比对照组高出了2.1日倍.这说明其细胞膜正常完整的结构被严重破坏实验表明用处理,其电导率均有不同程度的提高+也印说明肌增强了细胞膜的透性.而用试验的各档浓度的…处理,其各档浓度组的电导率均比对照组低.这从一个方而反映了用…处理能够使愈伤组织浓度()细胞膜维持较完整的膜结构,从而图2阻对愈伤组织生长的影响增强了细胞的抗逆性.一些试验证明,用多效唑处理可以提高番茄的抗逆性"和桃树花芽的抗寒性¨,这可能与…处理提高了
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