北沙柳及几种柳树过氧化物酶同功酶遗传变异的研究

安守芹
内蒙古林学院沙漠治理系

文章摘要:采用聚丙烯酰胺垂直电泳技术地北沙柳及其它柳树进行过氧化物酶同功酶遗传变异的研究。结果表明，试材共有酶带２５条，基本酶带９条，变异带１６条，其中有１条酶带为试材所共有。在沙柳无性系中是多的有１３条带，最少的４条带，从酶谱图中可知，按染色程度可划分为３个区，从负极到正极依次为Ａ，Ｂ，Ｃ三区，可假定分属为３个基因位点控制，每个位点从分子水平讲，含有多个座位亦即多个等位基因，从而表现了过氧化物酶同功酶的可
文章主题:北沙柳 无性系 过氧化物酶 同功酶 柳树 变异

文章内容：第3期内蒙古林学院学报(自然科学版)1.20.31998年8月.19987北沙柳及几种柳树过氧化物酶同功酶遗传变异的研究安守芹(内蒙古林学院沙漠捂面和浩特,010019)7./2,/一摘要采用聚丙烯酰胺垂直电泳技术对北沙柳及其它柳树进行过氧化物酶同功酶遗传变异的研究.结果表明:试材共有酶带25条,基本酶带9条,变异带16条,其中有1条酶带为试材所共有.在沙柳无性束中最多的有13条带,最少的4条带.从酶谱图中可知,按染色程度可划分为3个区,从负租到正桩依次为,,三区.可假定分属为3个基因位点控制,.每个位点从分子水平讲,舍有多个座位亦即多个等位基因,从而表现1过氧化物酶同功酶的多态性.同一无性束的同株或不同株酶谱相同再现性或重复性强不同无性束酶带,酶谱明显在内蒙,宁夏,新疆,陕西等干旱半干旱地区.是防风固沙保持水土的优良树种,也是沙区重要能源和经济树种.本研究属沙柳工业用材林95攻关课题的部分内容.通过95～97两年对伊盟,青海等13个产地105个沙柳无性系及小黄柳,乌柳等扦播试验,并初选出54个优良无性系的基础上,对其42个沙柳无性系,小黄柳,乌柳和部分辐射沙柳无性系,用聚丙烯酰胺电泳技术,进行过氧化物酶同功酶的分析,试图对初选优良无性系的遗传型亦即种性的再选择提供依据.1材料与方法1.1供试材料采自内蒙古林学院试验场沙柳试验地,二年生平茬株新梢顶端的嫩叶,其中无性系测定中选的34个无性系,宋中选的8个无性系,经辐射处理,性状奇异的3个无性系及小黄柳,乌柳共47个试材.1.2样品制备将采取的嫩叶洗净后,再用蒸馏水冲洗,放入冰冻研钵中加入2%的甘油,进行充分研磨,再移入移心管放入冰箱自由下沉24小时,然后离心,取上清液贮备待电泳.1.3电泳采用聚丙烯酰胺垂直板电泳,分离过氧化物酶同工酶,样品分离胶浓度为7.5,8.9,浓缩腔浓度为4,6.7,电泳缓冲液8一甘氨酸系统,8.3,每样孔加样量5:,初始电压为100.当指示剂进入分离胶后电压改为300,每次在04"冰箱内电泳3小时左右,待收锅日期1998一7一6一蜘耀型烛～翁一一～酶北～键囝柳80内荣古林学院学报1%98年前沿标记物泳动距前沿端时,关习电源.取出剥胶染色.每一试样在胶板上重复2～3次,然后按迁移率,带宽及酶带数,将酶谱画在坐标纸上,进行归类分析.2结果与分析2.1涉柳过氧化物酶曰功酶酶谱对42个沙柳无性系的实验结果用离差平方和法聚类分析.并画出聚类图.(见图1)圈车球品牝髓是一一田-第3期安守芹北抄柳及几种柳树过轼化物酶同功酶遗传变异的研究81从聚类图上在离差平方和5处断开,将酶谱分为1类,同时画出这10类酶谱及辐射无性系,小黄柳,乌柳共13种酶谱类型模式图.亦即13种表型.(见图2,表1)表1ⅵⅶ冤辐射小黄柳乌柳基车蕞谱一基车带——变异希图2沙柳等13种酶谱类型模武圈沙柳酶谱类型及相应的无性系酶谱类型无性系号ⅶ--06一04,ⅸ一04,一05达旗,ⅸ一1,ⅸ一05,ⅸ一03ⅶ一04,一02,ⅳ一0,—2一06,青海ⅳ一02,—8,ⅸ一4,ⅳ一06,一02,ⅶ一0,一12ⅳ--08ⅶ一3,一02,一03,—,一04,[--01,一0,—6一06,一07,ⅶ一2,一01,一07,一01,—--11ⅶ一2,一0,一08一05"¨"¨¨¨¨¨¨¨¨¨¨¨¨¨;".ⅳⅵⅸ内囊古幸;拳盹拳报1998年按迁移率间隔,酶带集中程度及染色深浅,沙柳酶谱明显地分为三个区,从负极到正极依次为,,三区.(1)区酶带(见表2)衰2区酶带情况)从表2看出,区有4条迁移值不同的酶带.在两条基本带中,值为0.23的酶带占99,为所有试材共有.而值为0.21,0.26的两条酶带,只是个别无性系所有属于变异带.(2)区酶带(见表3)衰3区酶带况从表3可知.为0.43,0.47,0.53,0.55,0.58,0.59的酶带其比例均大干5属于基本带,染色较深,酶活性较强.为0.39的酶带占39%,其稳定性和活性次之.为0.34,0.45,0.48,.50,0.52,0.56的酶带比恻在4～16之间,均为变异带.(3)区酶带(见表4)衰4区一带况从表4可知,区有8条迁移值不同的酶带,除了为0.64的酶带为基本带外,其余7条带所占比饲均小于5.属于变异常.因此,从以上三个带区不难看出,区有两条清晰而稳定的基本带,变异带较少,染色程度介于中间,而且多次重复实验,效果稳定,由此可见.该区酶带稳定,可重复性强,变异不明显.区酶带效多而又集中,有6条基本带7条变异带.染色最深,可见该区酶活性最强,属于强带区.在区的8条酶带中,只有一条基本带,其余均为变异带,染色最拽,变化复杂,变异明显,该区可视为弱带区.由于变异明显,可能是影响种问,无性系间性状差异的因素.2.2沙柳厦几种柳树过氧化枷酶同功酶的变异(1)沙柳无性系内酶谱比较通过2多个无性系,系内同株或不同单株的重复实睑,结果表明同一无性系同一单株或不同单株醇谱稳定,效果基本一致.再现性强,可重复性强.如图3所示第3期安守芹北抄柳及几种柳树过氧化物酶同功酵遗传变异的研究83●■■_●■■_●■■_●■■一一一●==■■■_●■■_●■■_●■■哪●■■_■●■一匕工==,匹●■■_●■■_●■■_●■■_===,=卫!==了口●___●___●___～0-03■～.～3～3一0一.罐圉3同一无性系同株硪不同单株酶谱照片及模式田图3中有2个无性系,照片中左到左.与右.到右.为同一无性系亦即ⅶ一03号,其中左,左?与右,右?为同一单株,左,,左与右,右为同一单株,可见同一无性系同一单株酶谱完全相同,同一无性系不同单株亦基本相同.同样,图中左.,左与右;,右.也是同一无性系亦即--03号,而左.,左?为同一单株,右.,右为同一单株.其酶谱也表现出相同的效果.(2)沙柳无性系问酶谱比较兰一兰一=一三三三84内蒙古林学院学报1998年-一,一【==一,一■■●-■■_●●■一一__,一__,_昼1嗣,,,●__,,,●●●=一==—1口-__--一,___■_