盐酸氟桂利嗪有关物质测定方法的研究

徐昌勇 陈晓莉

文章摘要:本文在Ｂａｌｅｓｔｒｉｏｎ，ｆ．；Ｊｉｒｉｌｌｏ，Ｒ，等人的研究及卫生部部颁标准的基础上，对盐酸氟桂利嗪的有关物质的测定方法进行了研究，由薄层色谱法改为高效液相色谱法，操作简单易行，分辩率高，重现性好，结果准确可靠。
文章主题:盐酸氟桂利嗪 薄层色谱 高效液相色谱 药物分析

文章内容：≯4)第六步:根据活计数所得某一稀释度的单位体积浓度,再作适当稀释,进行平板分离,使每一培养皿能长出2一50个菌落,培养到菌落生长发育完成后,即可对菌落进行观察和试验,或把单菌落移植斜面,以便进行各项试验.3.2,影响自然选育效果的因素自然选育不论以纯化为目的,或以获得优于原种的由自发突变产生的变种为目的,其效果的好坏决定于下列几种因素:第一:单孢子分散度的高低.单孢子分散度高,说明由单一孢子或细胞长成的菌落多,纯利一的机会多,如果由两个或三个或更多的孢子连在一起长成的菌落,其中有一个是变异的,那么长成后的这一菌落就不纯了.第二:要有一定的测试数量.为了纯化目的进行单孢子分离,可能多挑几个单菌落进行测试,以防不纯的菌落混杂其间;如果为了得到优于原利一的变种,那么挑取和测试的菌落越多,机会也越多.因为某一性状的自发突变的频率是很低的,如果不用大量的单孢分离后长成的菌落去测试,很难得到优于原利一的变种,要进行大量测试,这就需要相应的设备,人力和时间.第三:耍有对照和重复.在每一次或一批试验中,必需附有对照,即未经分离的原种,与孢子分离后所获得的分离菌株一起试验.对照是任何科学实验不能缺少的一个标准,没有标准,就分不出高低.重复也是科学实验的一个必要条件,把一次试验的结果来下结论,不免会有误差,一般经重复三次试验后,取其相近似的两次数据来下结论,就比较可靠.也就是说试验结果耍有科学的重演性.第四:实验条件必须统一,稳定.这里所谓实验条件,包括实验所用的原材料和各项设备以及操作方法,实验条件会影响实验结果,这是显而易见的.每次实验的操作方法必须固定不变,而每次实验所用的原材料和仪器设备,也必须固定不变.这样连续三次重复试验的结果,才能有互相比较的人体,才能保证实验结果的重演性.2-/?药物分析?盐酸氟桂利嗪有关物质测定方法的研究上海三堆制药公司测试中心朱耀昼徐昌勇,陈晓莉,曹华娟/4摘要——————7.7&;-本文在,;1,.等人的研究及卫生部部颁标准的基础上,对盐酸氟桂利嗪的有关物质的测定方法进行了研究,由薄层色谱法改为高效液相色谱法,操作简单关键词:盐酸■●.-__'一1.前言盐酸氟桂利)甲基一32—1-4-(2一丙烯基一3一苯基)一哌嗪二盐胶盐.虽为较成熟的血管扩张药,美国药典版和英国药典93版却均未收载,93年国内才有了卫生部部颁标准,其中有关物质的分析是采用薄层也谱法,根据,;[1,+等人的研究表明,如果展开荆选择不当,其可能夹带的少许的结构相似的-(2一氟苯基)(4一氟苯基)甲基卜4-(2一丙烯基一3一苯基)一哌嗪就得不到有效分离,采用高氯酸法分析含量显然不能反映真实情.为此,我们结合现有的实验条什对盐酸桂利嗪的有关物质进行了研究,经采用高效液相色谱法来检测盐酸氟桂利嗪的有关物质,与薄层色谱法比较,分离效果好,分辨率高,重现性好,操作简单易行,准确可靠.实验部分2.2.薄层色谱实验2.1.1,仪器与试剂254硅胶薄层扳(北京事医学科学院),层析缸(型,200200),10注射器,254紫外灯,二氯耳烷(分析纯),甲醇(分析纯),习:已烷(分析纯),丙酮(分析纯).样品:3号样品(市售符合部颁标准),号,2号,5号,6号(乖公司合成提纯所得),7号(水公司合成粗品),4号为对照溶液.2.1.2实验结果按卫生部部颁标准所验,所得结果如下图圈】,样品薄层色谱圉(1.1号样2.2号,3.3号样品,4.对照液主斑点5.5号样..6.6号样品.77号样品)从上图的实验结果可以看:号,2号,3号,5号,6号样品?】的有关物质均低于部标准的规定,7号样品不符合要求.用高氯酸非水滴定法测定其含量,见表,1表可以看:,3号样,4号样品,5号样品的含量均在99.%以上,均符合标准.2.2'液相色谱实验2.2.2,仪器与试剂色谱仪:高效液相色谱仪,配备5泵,6进样器,486型紫外可变波长检测器,746数据处理仪.一33—色谱柱:100-18(5#)流动相::20=7:3内含1%的3一检测波长:254流量/,,实验用水为超纯水(—净化产生),试剂:腈(光谱纯),三乙胺(分析'纯)样品:与2.1中的样品相同2.2.2.实验步骤与图谱,将样品用流动栩溶解成1/乙,进样姑为2,在仪器稳定的情况下,分别对各样品进样,最后进一次空白(流动相),用以上样品产生的图谱减去空白图谱,所得即为各样品例谱(如下各图)-闰2.号样品液树图谱1:2.5粤样品液相图谱图2.6号样品液相图谱图2.3号样品液相图谱3,结果与讨论3.1图谱分辨率的比较图2.2号样圈2.7号样品液相图谱号2号3号5号6号7号含量(商氯蕞渣定9824%98.94%99.83%9983%9981%84.85%尊扳分辨串(斑点个数1222223菠相分辨串(峰十数7个以上5个以上4个以上6十以上6小以9小-均有一个吸收峰,根据文献报道该吸收峰应是二(2一氟苯基×4一氟苯基)甲基_4--(2一丙烯基_3一苯基)一赈嗪,其结构与氟桂利嗪极为相似目前的薄层色谱-34一条件是不能把它们分开的.采用液相色谱法不仅能分离该杂质,而且2号,3号,7号样品.因8.07分左右的吸收峰的面积相对于主峰的而积超过了1.0%.3.2.重现性的测试在相同的条件下,重复进样5次,记录主峰面积,得下表度量1号2号3号5号6号7号平均峰面积38750874】465650405535724105776939765800344256:标准.瞌差769250.4657957.9388468838.329274-57233.变异系数98%.59%0.0%0.22%3.25%1.7%综上所述,用高效液栩色谱法测定有物质具有较高的分辨率,能分辨出与其结构非常相似的-【--(2一氟苯基)(4一氟苯基)基】-42一丙烯基—3一苯基卜哌嗪,并具有较好重现性,可靠准确.一35—