平菇代料栽培中污染木霉菌的鉴定

高苇 李宝聚 孙军德 石延霞
[1]沈阳农业大学土地与环境学院,沈阳110161 [2]中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京100086

文章摘要:从北京平菇（Pleurotus ostreatus）产区收集的木霉病害样本，通过分离纯化及显微观察，确定了5种引起袋栽平菇发病的木霉菌，分别是绿色木霉（Trichoderma viride）、康氏木霉（Trichoderma koningii）、拟康氏木霉（Trichoderma pseudokoningii）、哈茨木霉（Trichoderma harzianum）和桔绿木霉（Trichoderma citrinoviride），并发现了平菇栽培中的优势污染种——绿色木霉和康氏木霉。
文章主题:平菇 木霉 分生孢子梗 分生孢子

文章内容：食用菌学报⑥2007.14(3):81～85文章编号:1005—9873(2007)03—0081—05平菇代料栽培中污染木霉菌的鉴定高苇～,李宝聚,孙军德,石延霞(沈阳农业大学土地与环境学院,沈阳110161;中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京100086)摘要:从北京平菇()产区收集的木霉病害样本,通过分离纯化及显微观察,确定了5种引起袋栽平菇发病的木霉菌,分别是绿色木霉(),康氏木霉(),拟康氏木霉(户"00),哈茨木霉()和桔绿木霉(),并发现了平菇栽培中的优势污染种——绿色木霉和康氏木霉.关键词:平菇;木霉;分生孢子梗;分生孢子中图分类号:$646,140.1文献标识码:木霉属()隶属于半知菌亚门(),丝孢纲(),丝孢目(),丛梗孢科()_],是一类普遍存在的真菌,也是危害平菇生产的主要病害.平菇,学名糙皮侧耳(),隶属于担子菌亚门(),层菌纲(),伞菌目(),侧耳科(),侧耳属()_2,是中国的主要栽培食用菌之一.平菇栽培主要以棉籽壳,麦麸等纤维素含量丰富的基质为栽培料,且生长在空间相对密封,阴暗潮湿的环境中,这些营养及环境条件也适应许多杂菌的生长,特别是木霉菌的生长,对平菇生产造成严重的危害.木霉对菌棒的危害包括两个方面,一是寄生于子实体上,导致子实体霉变腐烂;此外还会造成培养料污染,使出菇量减少,严重时导致整批报废_3.笔者在北京大兴,房山和通州区等木霉污染大量发生的平菇栽培区采集了大量的污染培养料样本,对其进行分离纯化培养,并依据产孢区形状,孢子梗分枝方式,瓶梗着生方式,形状及数量,分生孢子的形状,大小等形态性状和培养特征即菌落形状,色素的有无等传统的形态学鉴定方法.对分离到的木霉病原菌进行种的鉴定,旨在了解平菇木霉污染菌的种类及优势种,以确定北京平菇产区污染木霉的种群结构,为木霉病害的防治提供一定的参考.1材料与方法1.1样本采集从北京大兴,房山,通州区等菇房内采集大量受木霉污染的平菇菌袋,放入4℃冰箱中保存备用.1.2分离纯化从采集到的污染培养料上挑取木霉孢子,在()培养基上26℃培养2,待长出菌落后立即纯化培养_8].1.3显微鉴定在培养基上培养2,菌落还未看到孢子产生时挑取菌丝制片,观察分生孢子梗的形态;培养3～5后,菌落上可以看到明显的绿色或深绿色孢子,挑取分生孢子制片,观察孢子的形态大小.2结果与分析通过显微形态观察,并依据木霉分类的研究报道及显微形态的描述,对分离到的265株木霉菌种进行鉴定,发现其中绿色木霉(.)的数量最多,占48.3;康氏木霉(丁.)次之,占28.39/5.同时,还鉴定到拟康氏木霉(.),哈茨木霉(.)和桔收稿日期:2007—08—09原稿;2007—0825修改稿基金项目:农业部引进国际先进技术项目"食用菌优异种质资源和安全生产技术体系引进与创新"[26一11(2)],自然资源平台项目"农业微生物菌种资源整理,整合及共享试点"(200521201—6),科研研究院所社会公益专项"设施同艺作物病害无公害控制共性技术研究"(20044153)的部分研究内容本文通讯作者82食用菌学报第4卷绿木霉(.)3种木霉.但所占比率较低(见表1).表1平菇栽培料中污染木霉的鉴定2.1绿色木霉()图1绿色木霉(.在平板上的菌落形态..菌丝及孢子梗形态).(.,.)培养特征:菌落生长快.在平板上28℃培养48后,菌落直径达3050..菌丝为白色绒状.随着菌落的扩大.从巾心开始出现轮状的产孢区,并逐渐向外扩展.孢子颜色由白变绿,呈粉末状.整个菌落整齐而扁平.培养后,老熟的菌落正面为暗绿色,背面无色(图1一).2.2康氏木霉()微形态:菌丝分枝较多,并具有横隔,菌丝壁光滑.孢子梗呈环状排列.次级分枝单个或以2～3个为一组,分枝常常弯1或呈波状.瓶梗对生或轮生.基部缢缩,中间膨大,顶端变窄,呈葫芦形(图).分生孢子球形或椭圆形,表面粗糙,大小为2.0～3.2×3.～4.0肚.图2康氏木霉(.在平板上的菌落形态..菌丝及孢子梗形态).2(.,.)培养特征:在培养基上28℃培养48后,菌落直径为30～4012,大约(1能长满平板.产孢前(培养60内)平板上布满白色菌丝,大约第3天时菌落中问形成一轮明显的产第3期高苇,等:平菇代料栽培中污染木霉菌的鉴定83孢区.培养7后,菌落老熟,菌落正面为深绿色,背面无色,浅黄色或褐色.菌落一般无味(图2一).显微形态:分生孢子梗分枝众多,主分枝上又以2～3个为一组长出次级分枝,分枝长而细.2.3拟康氏木霉("足)分生孢子梗较直,分枝角度大,多与主枝成直角,整个外形成树状.瓶梗为葫芦形,上部变细.瓶梗对生,轮生,或不规则地着生于孢子梗上,孢子梗末端瓶梗较长(图2-).分生孢子绿色,椭圆形或近圆柱形,大小为2.8～5.2×1.9～2.6.图3拟康氏木霉(.在平板上的菌落形态,.菌丝及孢子梗形态).35七,,(.,.)培养特征:菌落生长快,在平板上28℃培养48,菌落直径达50～6左右,3就可以长满平板.菌落正面为明显的水绿色,背面无色或呈黄色(图3一).显微形态:菌丝有隔膜.分生孢子梗主分枝2.4桔绿木霉()长,次级分枝多直角伸出.瓶梗2～5个对生,轮生,单生或问生.小瓶梗中间略膨大,顶部变细.终极瓶梗延长,基部不变细(图3-).分生孢子呈球形或短圆柱形,较小,一般为1.5～2.5×2.0～4.5.图4桔绿木霉(.在平板上的菌落形态..菌丝及孢子梗形态).4(.,.)培养特征:在平板上28℃培养48,菌落直径为40左右,产孢前(72之内)气生菌丝较少,紧贴培养基生长,并产生黄绿色色素.3后(产孢时),在平板上形成众多疏松不规则的茶绿色丛束.菌落背面为明显的黄色或黄绿色(图4一).显微形态:分生孢子梗的主分枝较长,分枝简单,次级分枝常不等间距的单生,或对生,分枝较短.瓶梗一般不多于3个,单生,对生,少轮生(图4-).瓶梗基部稍有缢缩,顶部极细.分生孢子为淡绿色,圆形或椭圆形,大小为1.9～3.1×1.5～2.2.2.5哈茨木霉()培养特征:在培养基上28℃