用DNA显微注射技术生产转基因鸡

文章主题:鸡 育种 DNA显微注射 转基因鸡

文章内容：将来很有可能生产出能表达有用性状的转基因家禽,进抗病性和产品质量.重组技术和遗传工程的出现导致了科学,医学和生物技术等众多领域迅速和引人注目的发展.这项突破,加上目前在胚胎处理技术的发展,使科学家能够生产出各种转基因生物体,也就是将外来基因嵌入其染色体组内的动物或植物.转基因动物【尤其是小白鼠和昆虫1对于了解基因在诸如发育,肿瘤学和免疫学中的功能与调节作用起到了重要的作用.最近?转基因小白鼠在医学中作为动物模型用于防纠?以提高生长率和产量,同时改在宿主蛋壳中的转基因胚胎,约在出壳前36小时.其屎囊绒鹿已被嚎穿旺眙已开始呼吸但强内仍尧南血葭并起全部作用-(国际家禽&;治人类疾病和创新的基因治疗方面发挥了重要作用.现在,科学家正将这个有价值的技术用于农畜,即引进对某些期望性状如抗病性,生长和产量性能等1产生作用的基因,可望获得不同程度的成功.或许在"分子养畜业"方面取得的进展最为明显,例如把能直接表达新型蛋白质的转基因引进乳腺,改变猪,绵羊,兔和山羊的奶成分,较为经济地生产出优质并有治疗作用的蛋白质或工业用蛋白质.目前已实验性地生产出20多种不同的蛋白质.最近,在苏格兰和德国的一些生物技术公司取得一项研究成果,他们用绵羊奶生产出-抗胰蛋酶,这是一种用于治疗肺气肿的药物,不久即将投入商品化生产.由于大家畜的世代间隔长,生产力低,建立转基因系的费用较高,困难较大.相反,建立一个转基因鸡群费用低,生产率高,比其它家畜有明显优势.因此,世界范围内有几个研究实验室采用不同的战略生产转基因鸡.直到最近,唯一成功的报道是利用逆转病毒将转基因转染到新产蛋的胚胎细胞中或转染到培养的原生殖细胞中.然而,在利用逆转病毒方面还存在许多问题生产这种病毒比较费工,只能携带有限的转基匿,有可能重1995年2月鸡勿呜日,用$/一组而形成新的致病菌株以及公众接受性差一研究所没有采用逆转病毒而成功地生产出转基因鸡他们的方法是将基因直接注入近期受精的鸡卵:卵黄冲,然后孵化直至出雏用于进行注射的鸡卵在母鸡输卵管膨大部收集它们被一层薄薄的蛋白质包围但没蛋壳.随后研究出一个综合性的培养系统,为处理后的鸡卵提供最佳的生存条件.这个系统分三个阶段,用宿主蛋壳作为培养皿,将薄层白蛋白用盐溶液稀释后作为培养基.培养的第一阶段阶段1)持续24小时将注射后的鸡卵放在含少量培养基的开窗蛋壳中注意不要盖住胚盘在这一阶段蛋黄中的胚胎从单细胞发育成6厅个细胞,具有正常产蛋卵的囊胚层特点在蛋壳的上部倒入白蛋白全部盖住胚胎,然后用胶膜将蛋窗封好第二阶段:阶段2,约65时在这个阶段应发育成一个截然不同的胚胎,具有一个起作用的心脏和一个额外的胚胎循环,第三阶段阶段31时间最长,一直到出雏,将周围有卵黄和培养基的胚胎转移到第二个较大的宿主蛋壳,并为其提供一一个人工气室,这在五胎开始用肺呼吸空气和准备出壳的副胚阶段非常必要.在出雏前1.2天?当胚胎开始用肺呼吸时,把密封胶膜打一些,使空气进入.最后将胶膜打开使小鸡顺利出壳用于进行注射的卵必须在受精后立即收集以防止其进入输卵管因此9呼化的第一阶段是在替代的输卵管内进行——一个摄氏42度鹏的体温),相对湿度较高和二氧化碳含量高氧1的孵化器.在阶段1的末期有一个较短的室温阶段:以模仿产卵过程.阶段2和阶段3的孵化条件正常鸡蛋人工孵化阶段的条件相同)与传统方法相比有所改变.其相对湿度提高到75%左右直至第8天,其后降至65%,准备出雏.在阶段2,转动次数增加,每小时将培养液摇动四次.在阶段3,将转动角度减小,以防止坯胎粘在密封胶膜上.通过这种方法1或任何方法1生产有潜力转基因雏鸡是一项艰辛的工作.只有50%注入的卵能存活到阶段3,而出雏率仅在5‰左右.然而,对用这些实验方法生产的胚胎和雏鸡的分析结果还是令人鼓舞的.使用敏感的多聚酶链反应光照与骨强度英国的研究人员最近调查了在产蛋期内各种不同的光照方式对终止产蛋母鸡的骨强度及骨折发生率的影响.在1993年《应用家禽研究杂志》_1.2的报告中他们指出曾在两次试验中将间歇光照方式3:34:与传统的光照方式15.'或7:7对产蛋母鸡骨强度的影响进行了对比.骨强度是根据眩骨与胫骨的断裂强度进行评定的在其中一项对比试验中?发现采用33(4×涧歇光照方式的母鸡在终止产蛋时的胫骨强度较低.在第二项对比试验中,采用334×1光照处理的母鸡在产蛋期内没有显示骨强度有任何提高.试验结果表明?间歇光照方式作为改进母鸡骨强度的一种方法,并没有比传统光照方式具备任何优点.6《国际家禽》的结果已证实,几乎有一半存活2天以上的胚胎和雏鸡自样品中台有转基固.在对出只小鸡进行测定后发现,它膜尿囊膜,血液和羽髓中都基因.其中一只小公鸡的转;平一直保持到发育成熟其也含有转基因并已将其中自成功地传给了后裔?即412只的14只.现已生产了第二代一并表明转基因以正常的盂德:进行遗传,其中的75%为转;这些结果已在生物技术杂志)1994年1月1上目前正在进行有关测定遗些)基因在调节表达方面的实验这些工作很有希望取得它表明可以不用逆转病毒生因鸡,即是说建立转基因鸡行的.将来很有可能生产出1有用转基因的鸡,这将有助扩大对鸡的发育方向的知识强鸡的抗病性,改进数量性:至使母鸡能在其卵中分泌有.值和治疗作用的蛋白质.这项工作得到英国农渔的部分资助.——如鹱丁堡./研究所讪0出,苏倍兰.图:取内脏加工过程采用了带夹爪的结构,而不是小匙.(上图见于《国际客套》一九九四年第一期第56页,在该期刊上下倒转-现予吏正.)9